九月過(guò)半，秋風(fēng)習(xí)習(xí)，在前面的技術(shù)文章里，我公司為您分析過(guò)ELISA實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，今天是本周的第三個(gè)工作日，上海恒遠(yuǎn)為您補(bǔ)充ELISA檢測(cè)要點(diǎn)，供參考。
 

·要點(diǎn)一：
    血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)留意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)開釋出具有過(guò)氧化物酶活 性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。ELISA的操縱因 固相載體的形成不同而有所差異，海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點(diǎn)。
 

·要點(diǎn)二：標(biāo)本的采取和保留
    可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗 體或抗原成份。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保留作多次檢測(cè)，宜 少量分裝冰存。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存 。如在冰箱中保留過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA 中可使本底加深。保留血清自采 集時(shí)就應(yīng)留意無(wú)菌操縱，也可加入適當(dāng)防腐劑。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢 測(cè)標(biāo)本。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操縱步驟的留意要點(diǎn)，珠式、管式及磁性球ELISA，試劑盒 均與特殊儀器配合應(yīng)用，兩者均有具體的使用說(shuō)明，嚴(yán)格遵照劃定操縱，必能得出正確的結(jié)果 。
   

·要點(diǎn)三：
    的試劑，良好的儀器和準(zhǔn)確的操縱是保證ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果正確可靠的必要前提。 血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同即是血清。 如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP ，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定 ，有些則需經(jīng)預(yù)處理。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、xue塊 收縮后即可取得。大部門ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可平等應(yīng)用。凍結(jié) 血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和， 不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，澄清后再檢測(cè)。
   

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